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RNeasy FFPE Kit Print
從福爾馬林固定、石蠟包埋的組織切片中純化總RNA
創(chuàng)新的方法用于克服福爾馬林造成的交聯(lián)
有效的釋放RNA而不破壞其完整性
高效的實(shí)驗(yàn)方案，在85分鐘內(nèi)即可獲得純化的RNA
RNeasy FFPE Kit專為從福爾馬林固定、石蠟包埋的組織切片中純化總RNA而設(shè)計。*的裂解和孵育條件逆轉(zhuǎn)福爾馬林對RNA的修飾。并且裂解緩沖液可將RNA從組織切片中有效釋放出來，防止RNA的進(jìn)一步降解。試劑盒同樣使用
RNeasy FFPE Kit Print
貨號/ ID：73504
RNeasy FFPE套件（50）
50個RNeasy MinElute離心柱，收集管，蛋白酶K，無RNase的DNase I，DNase Booster緩沖液，無RNase的緩沖液，無RNase的水
原理
用福爾馬林固定組織會導(dǎo)致RNA-RNA和RNA-蛋白質(zhì)的交聯(lián)，這會影響RNA在酶學(xué)分析中的性能。FFPE樣本固定和包埋同樣會導(dǎo)致核酸的嚴(yán)重片段化。RNeasy FFPE Kit提供了*的裂解和孵育條件來逆轉(zhuǎn)福爾馬林對RNA的修飾。裂解緩沖液能使RNA從FFPE組織樣本中有效釋放，并防止進(jìn)一步的RNA降解。經(jīng)優(yōu)化的條件能純化得到所有可用的RNA，使用RNeasy FFPE Kit從FFPE樣本中得到的RNA的產(chǎn)量比其他方法更高。
程序
整個RNeasy FFPE操作流程可在85分鐘內(nèi)完成（參見"RNeasy FFPE procedure"）。使用蛋白酶K裂解樣本僅需15分鐘。裂解后，樣本在80oC下孵育15分鐘。之后，用DNase處理能有效去除樣本中的基因組DNA，包括小的DNA/片段。后，使用RNeasy MinElute離心柱即可收集純化的RNA，洗脫體積14–30 µl。
應(yīng)用領(lǐng)域
RNeasy FFPE Kit可純化FFPE 樣本中所有大于70 nt RNA，得到適用于RT-PCR等眾多下游應(yīng)用的RNA/片段。但是，從FFPE樣本中純化得到的RNA會嚴(yán)重片段化，不能用于需要完整RNA的下游應(yīng)用。如果使用片段化RNA可能需要做些修飾（例如在RT-PCR時設(shè)計小的擴(kuò)增子）。進(jìn)行cDNA合成時，不能使用oligo-dT引物，而要使用隨機(jī)或基因特異性引物。
技術(shù)指標(biāo)
特征 | 技術(shù)指標(biāo) |
| 應(yīng)用 | PCR，qPCR，實(shí)時RT-PCR，微陣列 |
| 洗脫體積 | 14–30微升 |
| 規(guī)格 | 旋轉(zhuǎn)柱 |
| 主要樣本類型 | FFPE組織樣本 |
| 處理 | 手動（離心），自動化（QIAcube） |
| 純化總RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 | 核糖核酸 |
| 樣本量 | 1 * 5 µm至4 * 10µm切片 |
| 技術(shù) | 二氧化硅技術(shù) |
| 每次運(yùn)行或制備時間 | 70分鐘 |
| 產(chǎn)量 | 變化 |
